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臍帶間充質干細胞復蘇流程

更新時間:2024-12-18點擊次數:1171
  臍帶間充質干細胞(UCMSCs)是一種來源于臍帶的多潛能干細胞,具有廣泛的應用前景。臍帶間充質干細胞可以在進行UCMSCs的復蘇過程中,需要注意以下幾個主要步驟:
 
  臍帶間充質干細胞(umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs)是一種來源于臍帶的多潛能干細胞,具有廣泛的應用前景。這些干細胞具有較強的自我更新能力和多向分化潛能,能夠分化為多種細胞類型,如骨細胞、肌肉細胞、神經細胞等。
 
  臍帶間充質干細胞無血清培養基可用于臍帶間充質干細胞的原代培養及多次傳代,同時還能保持其多向分化的潛能,如分化為骨細胞、軟骨細胞等,使用時無需添加血清或血清替代物。
 
  以下是使用臍帶間充質干細胞無血清培養基進行臍帶間充質干細胞復蘇的流程:
 
  (1)將臍帶間充質干細胞無血清培養基平衡至室溫,每個培養瓶加入15ml 的臍帶間充質干細胞無血清培養基。
 
  (2)取出凍存的細胞,置入37℃水浴鍋中快速解凍。
 
  (3)立即吸取解凍后的細胞懸液轉移1ml至15ml離心管中,逐滴加入4ml臍帶間充質干細胞無血清培養基,混勻后計數。
 
  (4)根據計數結果,按照合適的接種密度(推薦8000cells/cm2)。將細胞接種到已加入15ml 臍帶間充質干細胞無血清培養基的細胞培養容器中。
 
  注:若細胞凍存液中不含DMSO,可將細胞直接加入20ml臍帶間充質干細胞無血清培養基中,且第二天無需換液。
 
  (5)將細胞放在37℃,5% CO2培養箱中培養。
 
  (6)12h~24h后,待細胞正常貼壁,棄去培養上清,加入新鮮的、已平衡至室溫的20ml臍帶間充質干細胞無血清培養基。根據細胞生長情況,每3天換液至細胞融合度達到80%~90%。
 
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