轉(zhuǎn)染試劑是分子生物學(xué)與遺傳學(xué)領(lǐng)域中的小幫手。在它的幫助下，科研人員可以將外源基因如DNA或RNA導(dǎo)入到細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄與表達(dá)。然而，為了保證高轉(zhuǎn)染效率并保護(hù)細(xì)胞不受破環(huán)，正確的使用和儲(chǔ)存轉(zhuǎn)染試劑是至關(guān)重要的。不當(dāng)?shù)谋４婵赡軙?huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染試劑的性能有所下降，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。本文將探討Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的保存條件、如何正確儲(chǔ)存該轉(zhuǎn)染試劑以及實(shí)驗(yàn)中可能會(huì)遇到的問(wèn)題。

 一、 保存條件與正確儲(chǔ)存方法

正確的儲(chǔ)存是保證PEI轉(zhuǎn)染效率和使用壽命的基石。

1.  儲(chǔ)存溫度：

       未滅菌的粉末或濃縮液： 應(yīng)長(zhǎng)期保存在 -20°C。這是最關(guān)鍵的一點(diǎn)，可以最大限度地保持其活性和穩(wěn)定性。

       已過(guò)濾除菌的工作液（如1 mg/mL）： 可以在4°C保存，也可以在-20°C保存。

           4°C保存： 方便使用，避免了反復(fù)凍融。在4℃下可以穩(wěn)定保存數(shù)月甚至更久。

           -20°C保存： 對(duì)于計(jì)劃長(zhǎng)期儲(chǔ)存（超過(guò)半年）的工作液，建議分裝后存于-20°C，以保持最佳性能。

2.  分裝策略：

       強(qiáng)烈建議進(jìn)行分裝！ 無(wú)論是粉末還是配制好的工作液，都應(yīng)根據(jù)您的日常使用量，分裝到無(wú)菌的小管中。

       目的： 避免反復(fù)凍融和細(xì)菌污染。反復(fù)凍融是導(dǎo)致PEI轉(zhuǎn)染效率下降和溶液出現(xiàn)沉淀的主要原因之一。

3.  溶解與配制：

       粉末配制：

           使用無(wú)菌的去離子水（如Milli-Q水）溶解粉末，配制成高濃度儲(chǔ)備液（如10 mg/mL）。

           溶解時(shí)，需要用鹽酸（HCl）將pH值小心地調(diào)節(jié)至2.0左右，并加熱（如50-60°C）以幫助其wanquan溶解。

           wanquan溶解后，再用NaOH將pH值回調(diào)至7.0。

           最后，必須使用0.22μm的濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌。

       工作液稀釋： 將無(wú)菌的儲(chǔ)備液用無(wú)菌水稀釋成常用的工作液濃度（如1 mg/mL）。同樣需要確保無(wú)菌操作。

4.  穩(wěn)定性：

       在正確儲(chǔ)存條件下（-20°C， 避免反復(fù)凍融），PEI非常穩(wěn)定，可以保存數(shù)年。

 二、 實(shí)驗(yàn)中可能遇到的問(wèn)題及解決方案

PEI轉(zhuǎn)染的成功依賴于多個(gè)因素的精細(xì)平衡。以下是常見問(wèn)題及其排查方向：

請(qǐng)看《PEI轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中可能遇到的問(wèn)題及解決方案》

總結(jié)： Polysciences PEI是一款強(qiáng)大且經(jīng)濟(jì)的工具，但其成功應(yīng)用依賴于正確的儲(chǔ)存、精確的比例優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化的操作。如果遇到問(wèn)題，請(qǐng)從PEI/DNA比例、DNA純度、細(xì)胞狀態(tài)和復(fù)合物形成過(guò)程這幾個(gè)核心環(huán)節(jié)逐一排查。

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